Стабильность ELISA ≤± 0,003Abs Микотоксинный тестер ST-2000A Диапазон длины волны 400-900nm

ST-2000A Тестер микотоксинов

Анализатор микотоксинов СТ-2000А – необходимый аналитический прибор для проведения афлатоксинового и иммуноферментного анализа. Принцип твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), а именно твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), состоит из данного прибора и набора В1, который можно использовать для определения содержания афлатоксина В1 и других микотоксинов в пробах. ограниченным и количественным способом (при наличии других наборов можно обнаружить и другие токсины). Он широко используется для обнаружения афлатоксина B1 и других микотоксинов в пищевых продуктах, кормах, масле, молочных продуктах, лекарствах, напитках, вине и других продуктах.

Характеристики производительности:

1. Работа дисплея: цветной ЖК-экран, распределительная плата видеотелефона, отображение всей информации о плате, работа сенсорного экрана.

2. Функция вибрационной пластины: скорость вибрационной пластины уровня 3, время регулируется 0-255 секунд.

3. Рабочая станция: профессиональное программное обеспечение для маркеров ферментов, которое может хранить 500 групп программ, 100 000 результатов образцов и обеспечивает широкие режимы расчета, такие как поглощение, линейное уравнение, логарифмическое уравнение, квадратное уравнение, кубическое уравнение, логарифмическое уравнение процента поглощения-концентрации, сплайн. функция, скорость торможения и т. д.

Технические параметры:

Источник света: импортная галогенная лампа постоянного тока 12 В 22 Вт.

Диапазон длин волн: 400-900 нм

Фильтр: 405, 450, 492, 630 нм в стандартной комплектации, другие длины волн опционально.

Диапазон чтения: 0－4.000Абс

Разрешение: 0,001 Абс

Ошибка индикации: ≤±0,01Абс

Стабильность: ≤±0,003Абс

Повторяемость: ≤ 0,3%

Размер: 400 мм×260 мм×200 мм

1 Принцип и применение

В этом наборе используется непрямой конкурентный метод ИФА для обнаружения афлатоксина B1 (AFB1) в зерне, кормах и других образцах. Набор состоит из меченого ферментом планшета, предварительно покрытого связывающим антигеном, маркером фермента хрена, антителом, стандартом и другими соответствующими реагентами. Во время теста добавьте стандартный раствор или раствор образца, афлатоксин B1 в образце и ферментную пластинку предварительно покрывают конъюгатным антигеном, чтобы конкурировать за антитела против афлатоксина B1. После добавления ферментного маркера используйте субстрат TMB для проявления цвета. Значение оптической плотности образца отрицательно коррелирует с содержанием афлатоксина В1, содержащегося в образце. Остаточное количество афлатоксина В1 в образце можно получить путем сравнения со стандартной кривой.

2 Технические индикаторы

2.1 Чувствительность набора: 0,03ppb (нг/мл).

2.2 Режим реакции: 25 ℃, 30–15 минут.

2.3 Нижний предел обнаружения:

Крупы................................................................. ..... 0,15частей на миллиард

Комбикорм............................. 0,3 частей на миллиард

Масло пищевое, арахисовое............................... 0,6ppb

Соевый соус, пшеница и другие корма............................ 0,3 частей на миллиард

Пиво................................................. 0,3 частей на миллиард

Вино, соевый соус, уксус............................ 0,15 частей на миллиард

2.4 Скорость перекрестной реакции:

Афлатоксин B1 100%

2.5 Скорость восстановления образца:

Зерновые и комбикорма............................ 85% ± 15%

Арахис............................. 82 ± 15%

Масло пищевое............................. 85 ± 15%

Соевый соус, пшеница и другие корма............................ 83 ± 15%

Пиво............................. 84 ± 15%

Вино, соевый соус, уксус............ 87 ± 15%

3 Состав комплекта

Пластина для ферментных маркеров....................96 отверстий

Стандартный раствор (черная крышка): по 1 мл.

0ppb, 0,03ppb, 0,06ppb, 0,12ppb, 0,24ppb, 0,48ppb

Раствор высокого стандарта: 100 частей на миллиард............................ 1 мл

Ферментный маркер (красный колпачок)............................ 5,5 мл

Рабочий раствор антитела (синяя крышка)............................ 5,5 мл

Раствор субстрата А (белая крышка)............................ 6 мл

Субстрат жидкий B (черная крышка)............................ 6 мл

Раствор для терминации (желтая крышка)............................ 6 мл

20-кратный концентрированный моющий раствор (белая крышка)........... 40 мл

Инструкция по эксплуатации....................1 копия

4 Необходимое оборудование и реагенты

4.1 Аппаратура: тестер афлатоксина, принтер, гомогенизатор, устройство для азотной осушки, осциллятор, центрифуга, градуированная пипетка, весы (чувствительность 0,01 г).

4.2 Микропипетки: одноканальные 20 мкл-200 мкл, 100 мкл-1000 мкл, многоканальные 300 мкл

4.3 Реагент: метанол, н-гексан, трихлорметан или дихлорметан.

5 Предварительная обработка проб

5.1 Инструкции перед обработкой проб:

Экспериментальное оборудование должно быть чистым и использовать одноразовую всасывающую насадку, чтобы избежать загрязнения и влияния на результаты эксперимента.

5.2 Приготовление раствора:

Решение 1: экстракт образца

70% метанола, т.е. V метанол: V деионизированная вода = 7:3.

5.3 Примеры этапов предварительной обработки:

5.3.1 Способ переработки зерна

1) Взвесьте 2 г измельченного образца в центрифужную пробирку емкостью 50 мл, добавьте 5 мл раствора для экстракции образца, встряхивайте в течение 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут в центре разделения;

2) Возьмите 0,5 мл надосадочной жидкости, добавьте 0,5 мл деионизированной воды и хорошо перемешайте;

3) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 5. Нижний предел обнаружения: 0,15 частей на миллиард.

5.3.2 Методы обработки образцов с сильным водопоглощением, таких как кукурузная шелуха и пшеничные отруби.

1) Взвесьте 2 г измельченного образца в центрифужную пробирку емкостью 50 мл, добавьте 20 мл раствора для экстракции образца, встряхивайте в течение 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут в центре разделения;

2) Возьмите 0,5 мл надосадочной жидкости, добавьте 0,5 мл деионизированной воды и хорошо перемешайте; (Для образца с чрезвычайно высоким содержанием токсина его можно разбавить 35% метанолом, а затем протестировать. Например, возьмите 0,1 мл смешанного раствора в 2) и смешайте 0,9 мл 35% метанола. Конечный коэффициент разбавления образца составляет 200, а предел обнаружения — 6 частей на миллиард.)

3) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления образца: 20. Нижний предел обнаружения: 0,6 частей на миллиард.

Примечание. Поскольку распределение токсина в образце неравномерно, необходимо взять образцы из нескольких точек и полностью перемешать их, прежде чем брать 2 г для анализа.

5.3.3 Метод обработки комбикорма

1) Взвесьте 2 г измельченного образца в центрифужную пробирку емкостью 50 мл, добавьте 10 мл раствора для экстракции образца, встряхивайте в течение 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут в центре разделения;

2) Возьмите 0,5 мл надосадочной жидкости, добавьте 0,5 мл деионизированной воды и хорошо перемешайте;

3) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 10. Нижний предел обнаружения: 0,3 ppb.

5.3.4 Методы обработки кормов пищевым маслом, арахисом и высоким содержанием жира

1) Взвесьте 2 г измельченного образца в центрифужную пробирку емкостью 50 мл, добавьте 8 мл н-гексана и 10 мл раствора для экстракции образца, встряхивайте в течение 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут в центре разделения;

2) Удалите верхнюю жидкость, возьмите 0,5 мл нижней жидкости и добавьте 0,5 мл деионизированной воды, хорошо перемешайте, затем возьмите 0,5 мл смешанной жидкости и добавьте 0,5 мл 35% метанола, встряхивайте в течение 30 секунд;

3) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 20. Нижний предел обнаружения: 0,6 частей на миллиард.

5.3.5 Продукты питания или приправы, такие как соусы, пшеница, печенье, выпечка, а также методы обработки кормов, такие как кормовые концентраты.

1) Взвесьте 2 г измельченного образца в центрифужную пробирку емкостью 50 мл, добавьте 10 мл раствора для экстракции образца, встряхивайте в течение 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут в центре разделения;

2) Берут 2 мл надосадочной жидкости, добавляют 4 мл трихлорметана (или дихлорметана), встряхивают 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут центра разделения;

3) Перелейте верхнюю жидкость в другой контейнер, оставьте нижнюю жидкость в режиме ожидания, добавьте еще 4 мл хлороформа (или дихлорметана) в верхнюю жидкость, полностью встряхните и перемешайте в течение 5 минут, а комнатная температура составляет 4000 об/мин/центр разделения для 10 минут;

4) Удалить верхнюю жидкость, дважды соединить нижнюю жидкость и полностью перемешать;

5) Возьмите 2 мл объединенной нижней жидкости и высушите ее при температуре азота 50-60 ℃;

6) Добавьте 0,5 мл экстракта образца для полного растворения высушенного вещества, а затем добавьте 0,5 мл деионизированной воды для перемешивания;

7) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 10. Нижний предел обнаружения: 0,3 ppb.

5.3.6 Способ обработки пива

1) Полностью перемешайте пиво (удалив CO2), возьмите 2 мл образца пива, добавьте 1 мл дистиллированной воды, добавьте 7 мл метанола и встряхивайте в течение 5 минут;

2) Возьмите 0,5 мл раствора смешанного образца и добавьте 0,5 мл деионизированной воды, чтобы хорошо перемешать;

3) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 10. Нижний предел обнаружения: 0,3 ppb.

5.3.7 Способ обработки вином, соевым соусом и уксусом

1) Возьмите 2 мл образца, добавьте 2 мл дистиллированной воды, добавьте 10 мл трихлорметана (или дихлорметана), встряхивайте 5 минут, 4000 об/мин при комнатной температуре/10 минут центра разделения;

2) Возьмите 1 мл нижней жидкости и высушите ее при температуре азота 50-60 ℃;

3) Добавьте 0,5 мл экстракта образца, чтобы полностью растворить высушенное вещество, затем добавьте 0,5 мл деионизированной воды и хорошо перемешайте;

5) Возьмите 50 мкл анализа.

Коэффициент разбавления пробы: 5. Нижний предел обнаружения: 0,15 частей на миллиард.

6 шагов ИФА

Выньте необходимый реагент из холодильной среды при температуре 4 ℃ и поместите его при комнатной температуре более чем на 30 минут. Могут присутствовать кристаллы, которые необходимо довести до комнатной температуры для полного растворения при хранении моющего раствора в холодильнике. Каждый жидкий реагент перед использованием необходимо встряхнуть. Выньте необходимое количество микропористых пластин и рамок, поместите неиспользованные микропористые пластины в самозакрывающиеся пакеты и храните их при температуре 2–8 ℃.

Перед экспериментом 20 × Концентрированный промывной раствор разбавляют рабочим промывным раствором в 20 раз.

6.1 Нумерация: последовательно пронумеруйте соответствующие лунки образца и стандарта, сделайте по два параллельных отверстия для каждого образца и стандарта и запишите положение стандартного отверстия и отверстия для образца.

6.2 Реакция добавления образца: добавьте 50 мкл/лунку стандарта или образца в соответствующие лунки, затем добавьте 50 мкл/лунку ферментного маркера, затем добавьте 50 мкл/лунку рабочего раствора антитела, закройте планшет крышкой. мембрану, осторожно встряхните в течение 5 секунд, перемешайте и проведите реакцию при 25 ℃ в течение 30 минут.

6.3 Промывка: Осторожно снять мембрану крышки, высушить жидкость в отверстии, полностью промыть лунку рабочим промывным раствором 250 мкл/отверстие 5 раз с интервалом 30 секунд и промокнуть насухо впитывающей бумагой ( пузырьки, которые не удаляются после похлопывания, можно проколоть чистой головкой пистолета).

6.4 Проявление цвета: добавьте 50 мкл раствора субстрата А и 50 мкл раствора субстрата В в каждое отверстие, осторожно встряхивайте в течение 5 секунд и хорошо перемешайте, и проявляйте цвет в темноте при температуре 25 ℃ в течение 15 минут.

6.5 Терминация: добавьте в каждую лунку по 50 мкл раствора терминации, осторожно встряхните и хорошо перемешайте, чтобы остановить реакцию.

6.6 Измерение значения поглощения: используйте тестер афлатоксина для измерения значения поглощения каждого отверстия при длине волны 450 нм (рекомендуется двойная длина волны 450/630 нм). Определение должно быть завершено в течение 10 минут после прекращения реакции.

6.7 Автоматический тестер афлатоксина ST-2000A автоматически завершает определение и автоматически выдает результаты.